導讀

2026年5月29日，國家藥監局發布2026年第51號公告，將《體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗方法》等8項檢驗方法納入《化妝品安全技術規范（2015年版）》，自2027年3月1日起正式實施。這是該試驗方法自2015年版規范實施以來的重大修訂。

體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗是評價化妝品原料及產品致突變性的核心方法之一，屬于動物試驗替代方法的重要組成部分。本次修訂在試驗標準、結果記錄、毒性評估等方面均有實質性升級，將對化妝品檢驗檢測行業產生深遠影響。本文將為您逐條梳理新舊版本的關鍵變化，助您提前布局、從容應對。

一、修訂背景與法規依據

根據國家藥監局公告（2026年第51號），本次修訂的8項方法替換原2015年版方法（詳見下圖）：

實施時間：新方法自2027年3月1日起強制實施，鼓勵相關單位提前采用。

適用范圍：化妝品注冊和備案相關檢驗，自實施之日起需按照新規執行。

二、新舊版本核心變化總覽

總結：新版方法在統計效力、結果精準度、數據可溯源性三大維度實現了全面升級。

※變化1：分析細胞數量大幅提升，統計效力顯著增強

變化解讀：分析細胞數量從差異化標準（100/200個）統一提升至300個，顯著增強了試驗結果的統計效力，減少了抽樣誤差。同時保留了陽性結果時靈活調整的空間，兼顧了試驗效率。

※變化2：裂隙與畸變分離處理，有效避免假陽性

新版方法明確要求：

· 裂隙（chromatid gap）單獨記錄和報告

· 裂隙 不計入總畸變頻率

操作流程圖

變化解讀：結果記錄從“粗放式"走向“精細化"，裂隙與畸變分離處理有助于避免假陽性誤判，對畸變亞型的分類記錄則便于數據溯源和實驗室間比對。

※變化3：細胞毒性指標明確定義，與國際標準全面接軌

新版方法在規范性方面更為嚴謹，明確規定：

 · 不建議采用處理組細胞數量與對照組細胞數量比值（RCC）作為細胞毒性指標（因為RCC無法反映細胞增殖動力學的變化，敏感度不足。）

· 應采用相對細胞增長數（RICC） 或相對群體倍增數（RPD） ，或原代培養淋巴細胞的有絲分裂指數（MI）（在活化系統存在或不存在兩種條件下確定細胞毒性）

標準對接

這一調整與OECD 473指導原則（經濟合作與發展組織體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗指南）一致，實現了中國標準與國際通行標準的全面接軌，對于化妝品出口企業的數據國際認可具有積極意義。

三、新舊版本全文逐條對照分析

為方便檢驗檢測機構和技術人員全面掌握修訂細節，以下對新舊版本全文進行逐條對照分析：

1. 范圍與試驗目的——無實質性變化

新舊版本在"范圍"和"試驗目的"條款中內容基本一致，均明確了本方法適用于評價化妝品原料及其產品的致突變性，檢測培養的哺乳動物細胞染色體畸變。

2. 定義——新增術語解釋

新版補充了"有絲分裂指數"（mitotic index）的定義，即中期相細胞數與所觀察細胞總數之比值，是一項反映細胞增殖程度的指標。該術語在新版中被列為細胞毒性的核心指標之一。

3. 試驗基本原則——無實質性變化

新舊版本均強調在加入和不加入代謝活化系統條件下試驗，使用中期分裂相阻斷劑處理細胞。新版同樣指出，雖然多倍體增加可能預示數目畸變，但本方法并不適合用于測定染色體數目畸變。

4. 試劑和受試物制備——新增"空白對照"要求

舊版：僅規定設陰性對照（溶劑對照）

新版：增加了空白對照要求——如未能證實所選溶劑不具有致突變性，溶劑對照與本實驗室空白對照背景資料有明顯差異，還應設空白對照。

解讀：這一調整加強了對溶劑背景干擾的控制，確保陰性對照結果的可靠性。

5. 受試物最高濃度設置——大幅修訂

這是本次修訂變化顯著的條款之一，新舊版本對比如下：

6. 活化系統——文字表述微調

舊版規定S9使用濃度為1%～10%（終濃度），新版將其明確為使用濃度為1%～10%（終濃度），并補充可使用經活力確認的商品化S9。核心配制方法未變。

7. 試驗步驟——分析細胞數量調整

新版主要修訂內容：

· 細胞系選擇：新增TK6細胞系，并增加"所用細胞系的選擇應具有科學依據"的要求

· 細胞培養：補充"當難以得出明確結論時，應更換試驗條件重復試驗"的指導

· 分析細胞數：舊版為100/200個，新版統一提升至300個

8. 試驗結果與統計處理——新增精細化要求

新版在"試驗結果"條款中增加了大量細化要求：

· 要求按亞型（斷裂、交換）分類列明畸變數量

· 裂隙需單獨報告，不計入總畸變頻率

· 多倍體和核內復制細胞需報告百分比

· 需記錄所有處理組及對照的同步細胞毒性測定數據

統計處理方法未變，仍為χ2檢驗、Fisher精確概率檢驗等。

四、關鍵實施時間節點

鼓勵提前采用

相關檢測機構可提前完成方法驗證和過渡

五、行業影響與應對建議

——對檢驗檢測機構

方法驗證：建議在2027年3月前完成新方法的方法學驗證，特別是確認分析300個中期分裂相細胞的操作流程和質控標準。

人員培訓：針對新版的精細化記錄要求（裂隙單獨記錄、亞型分類、多倍體百分比報告等），需對技術人員進行專項培訓，確保數據記錄的規范性和一致性。

SOP修訂：根據新版要求修訂實驗室標準操作規程，重點關注分析細胞數量、細胞毒性指標選擇（RICC/RPD/MI）、同步數據記錄等方面的更新。

試劑與質控：確保S9活化系統活性符合要求（能明顯活化陽性對照物），可考慮使用商品化S9以簡化質控流程。

——對化妝品企業

檢驗計劃調整：2027年3月1日后提交的注冊備案檢驗，須采用新版方法。企業應合理安排檢驗時間節點，預留充足緩沖期。

預算評估：分析細胞數量從100/200個增至300個，可能帶來檢驗成本和周期的適度增加，建議提前與檢測機構溝通確認最新報價和周期。

數據可比性增強：新版方法與國際標準全面接軌，檢驗數據在國際市場的認可度將顯著提升，有利于企業的國際化布局。

關注配套方法：本次公告共納入8項方法，除染色體畸變試驗外，還包括細菌回復突變等配套方法，企業應對全套方法變更進行系統了解。

六、總結：三大升級亮點

七、附錄：新舊版本主要差異速查表

齊氏生物將持續關注化妝品安全技術規范動態，第一時間為您帶來專業的技術解讀與行業洞察。歡迎關注我們的公眾號，獲取更多毒理學試驗方法的最新資訊。

免責聲明：本文基于國家藥監局2026年第51號公告及附件內容撰寫，僅供參考。具體實施以正式文件為準。

參考文獻

[1]  國家藥監局. 關于將《化妝品中三價鉻和六價鉻的檢驗方法》等8項方法納入化妝品安全技術規范的公告（2026年第51號）. 2026-05-29.

[2] 中檢院. 《體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗方法》對作染色體分析的細胞數進行了哪些調整以及為什么增加實驗結果分析？2026.

[3] 妝合規. 《體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗方法》修訂方法納入《化妝品安全技術規范（2015年版）》. 2026-06-02.

[4] OECD. Test No. 473: In Vitro Mammalian Chromosomal Aberration Test. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals, 2016.